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| ALUQUANT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| El Sistema Cuantificación del DNA Humano | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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El Sistema AluQuant (M. R.) utiliza la tecnología avanzada de Luciferasa, para producir una señal de luz que es proporcional a la cantidad de DNA HUMANO que se encuentra presente en una muestra. Esto asegura los resultados de una cuantificación precisa sin Gels, manchas ó preparaciones complicadas de reacciones PCR.
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| Es importante resaltar que se cuantificará únicamente el DNA HUMANO. EL sistema de cuantificación de DNA HUMANO AluQuant (M. R.) utiliza ensayos específicos para humanos, para secuencias sumamente repetidas en el DNA CROMOSÓMICO, para medir la cantidad de DNA HUMANO que se encuentra presente en la muestra. La figura # 1 resume los resultados de los experimentos que muestran la especificidad del sistema AluQuant. Únicamente se detecta el DNA HUMANO de un panel de diversas muestras de especies(*). Los contaminantes comúnmente encontrados en las muestras forenses, tales como e. Coli y levadura, no interfieren con la detección de DNA HUMANO. |
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| Figura
1. reactividad con el DNA NO-HUMANO. La señal
producida con el DNA DE especies fuente, fue comparada con la señal
producida de cantidades iguales de DNA HUMANO. |
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| EL
AluQuant es especifico para humanos, pero también puede dar resultados
con el DNA de los primates superiores. |
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| Obtenga resultados precisos, elimine las conjeturas. |
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| De
manera distinta a los métodos basados en manchas, el sistema AluQuant
le proporciona resultados numéricos objetivos. AluQuant utiliza un
formato de hibridación en solución base, que es extremadamente
efectivo para medir el DNA HUMANO. Los resultados obtenidos utilizando AluQuant
son precisos y no son ambiguos, lo que significa que usted elimina las conjeturas
relacionadas con la estimación de la concentración de DNA.
la figura 2 ilustra el producto generado utilizando el calculador AluQuant AluQuant utiliza una reacción de Luciferaza para producir luz. La cantidad de luz producida por la reacción, corresponde a la cantidad de DNA HUMANO, que se encuentra presente en su muestra. El producto resultante se lee por un Luminómetro. Usted no tiene que realizar complicadas electroforesis de Gel, llevar a cabo pasos con las manchas ó las reacciones PCR. |
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| FIGURA
2. el calculador AluQuant es un programa en EXCEL (MICROSOFT M.R.) hecho
a la medida que utiliza el producto del Luminómetro para calcular
la cantidad de DNA HUMANO que se encuentra en una muestra. |
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| El
sistema AluQuant elimina las conjeturas cuando se estiman las concentraciones
de DNA, sustituyendo la ambigüedad por resultados que pueden medirse. |
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| Obtenga resultados consistentes. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| El amplio rango de cuantificación del sistema AluQuant le proporciona resultados consistentes desde 0.1 hasta 20 ng. de DNA HUMANO. |
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| FIGURA
3. Alto rango Dinámico. La señal de luz producida por 3
estándares DNA diluidos independientemente, sometidos a análisis
al mismo tiempo. Las muestras de repetición fueron de: 0, 0.125,
0.25, 0.5, 1.0, 2.0, y 4.0 ng/ul. El volumen total que se sometió a análisis fue de 5 ul, que representa un rango de insumo de 0 20 ng de DNA Total. |
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| Reciba un soporte técnico superior. Un estudio realizado en los Estados Unidos de América reciente citó la alta calidad del soporte técnico proporcionado por la CÍA. PROMEGA como un factor importante en la satisfacción del cliente. Los especialistas técnicos regionales y los representantes de servicios técnicos de PROMEGA, son científicos altamente entrenados que proporcionan apoyo excepcional para todos los productos de IDENTIDAD GENÉTICA. PROMEGA también proporciona capacitación y soporte técnico para su red de distribución global, dirige talleres sobre TIPIFICACIÓN de DNA HUMANO y patrocina simposios importantes sobre la CUANTIFICACIÓN HUMANA. |
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| Marque la trayectoria de su proceso utilizando el equipo que usted prefiera. El sistema
de CUANTIFICACIÓN de DNA HUMANO AluQuant puede utilizarse como
un sistema manual ó automático. |
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Usted elige el Luminómetro. AluQuant es compatible con los Luminómetros de diferentes marcas de alta calidad. El sistema ha sido optimizado para usarse en dos Luminómetros de DISEÑOS TURNER (TURNER DESING), EL Luminómetro mod. TD-20/20 Y EL Luminómetro REPORTER MICROPLATE. |
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¿Necesita automatización? Ya la tiene. AluQuant puede automatizarse utilizando el sistema de manejo de líquidos BECKMAN-COULTER BIOMEK 2000 (M.R.). El utilizar este tipo de automatización, le permite cuantificar 80 muestras en dos horas con solamente 15 minutos de tiempo de manejo. |
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¡Combine
AluQuant y DNA IQ para obtener grandes resultados¡ El Sistema AluQuant produce resultados óptimos cuando su procesamiento frontal se combina con el sistema DNA IQ de PROMEGA (CAT. DC 6700). El utilizar ambos productos le da la ventaja de un DNA limpio, cuantificado con precisión, para usarse en preparación de muestras para la amplificación STR.
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| Información
para hacer pedidos. |
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| Sistema de Cuantificación de ADN Humano AluQuant™ | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Con Base en el Boletín Técnico No. 291 de Promega | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| I. Descripción | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| En
la identificación forense humana, se aplica muy frecuentemente la
alta sensibilidad de los ensayos múltiples por PCR para muestras
biológicas. Estos ensayos genotípicos funcionan óptimamente
con un intervalo de concentración relativamente estrecho para los
ADN moldes (productos genómicos), haciendo necesaria la cuantificación
exacta de ADN. Sin embargo, la cuantificación y el proceso de amplificación
pueden complicarse por la presencia de ADN de otras especies. La cuantificación
de ADN humano en una muestra puede ser distinguida de otras especies de
ADN a través del uso de sondas específicas de ADN humano.
Tal uso de sondas a menudo requiere la inmovilización del ADN blanco
en un soporte sólido, además de que la hibridación
de la sonda al ADN es seguida por una serie de pasos de lavado con mermas
debido a la remoción de la sonda delimitante. Este proceso puede
consumir tiempo, variando los resultados y limitando el intervalo de la
cuantificación. El sistema de cuantificación de ADN humano AluQuant™ utiliza sondas específicas de ADN y no requiere inmovilizar el blanco ni requiere lavados. Este sistema utiliza una sonda que es específica a elementos de repetición humana permitiendo la cuantificación sin amplificación por PCR. Adicionalmente la especificidad es proporcionada por la fidelidad de la ADN polimerasa en el reconocimiento de híbridos perfectos. Consecuentemente, el sistema de cuantificación de ADN humano AluQuant™ demuestra no ser afectado por la presencia de ADN de otras especies, incluso cuando el ADN foráneo es 10 veces mayor al ADN humano. El intervalo de cuantificación óptimo de este sistema con el protocolo sugerido es de 0.02 a 4ng/µl (con un máximo de 10µl muestra/reacción). La cuantificación de ADN humano por el Sistema de Cuantificación de ADN Humano AluQuant™ provee una serie de reacciones (Figura 1). Siguiendo una desnaturalización inicial, las muestras de ADN se incuban con la Solución Enzimática AluQuant™ (AluQuant™ Enzyme Solution) y la sonda específica-humana AluQuant™ (the human-specific AluQuant™ Probe). La Solución Enzimática AluQuant™ contiene READase™ Polimerasa (READase™ Polymerase) y READase™ Cinasa (READase™ Kinase). Esta unión producida por la reacción enzimática es relativa a la cantidad de ATP presente en el ADN humano. En una segunda incubación, el ATP producido en la primera reacción es utilizado por la luciferasa para producir una cantidad proporcional y mensurable de luz. El ruido u artefactos de fondo son determinados por un análisis coexistente de la muestra sin la sonda específica-humana. La cantidad de ADN puede ser calculado entonces a través de la comparación de la señal contra la cantidad de ADN estándar conocido. |
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Figura 1. Detección de ADN humano utilizando el Sistema de Cuantificación de ADN Humano AluQuant™. |
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| II. Componentes del kit | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| Condiciones
del almacenamiento: Guarde todos los componentes a -20 °C
etiquetados y en listados. Congele los restos del Reactivo L/L reconstituido
en los alícuotas, a -20°C protegiéndolos de la luz (por
no más dos semanas) o a -70°C. |
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| Evite Los ciclos de congelamiento-descongelamiento del Reactivo L/L reconstituido. Pueden verse disminuidas las señales de luz debido a un declive gradual en la actividad del luciferasa. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||